Aplicarea analizei HPLC în evaporatorul rotativ

Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) se mai numește și cromatografia lichidă de înaltă presiune, cromatografia lichidă de mare viteză, cromatografia lichidă de înaltă rezoluție și cromatografia modernă pe coloană. Este o tehnologie de separare analitică eficientă și rapidă dezvoltată rapid în anii 1970 și este un mijloc important de testare modernă de separare.

Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) utilizează lichid ca fază mobilă și adoptă un sistem de infuzie de înaltă presiune pentru a pompa faza mobilă, cum ar fi un singur solvent cu polarități diferite sau soluție mixtă de solvent și tampon cu diferite proporții în coloana cromatografică cu fază staționară. După ce componentele din coloană sunt separate, acestea intră în detector pentru detectare, astfel încât să se realizeze analiza probei.

Mecanismul de separare al cromatografiei lichide de înaltă performanță este același cu cel al cromatografiei pe coloană convențională, dar ambalajul este mai fin și trebuie împins de o pompă de înaltă presiune, care are o eficiență ridicată a coloanei și o viteză rapidă de analiză. Spre deosebire de cromatografia de gaze, faza mobilă din cromatografia lichidă participă și la procesul de separare a componentelor, iar compoziția, proporția și valoarea pH-ului acesteia pot fi ajustate în mod flexibil, cu diferite moduri de separare. În practică, valoarea de retenție și selectivitatea probelor în coloana cromatografică sunt ajustate prin modificarea compoziției fazei mobile, astfel încât diferite probe să poată fi separate.

 

Componentele analizei HPLC

 

Coloană: Coloana este componenta centrală a sistemului HPLC, care este utilizată pentru a separa compușii din probă. Coloanele de separare obișnuite includ coloana cu fază inversă, coloana schimbătoare de ioni, coloana de filtrare cu gel etc., iar selecția lor depinde de proprietățile compusului care trebuie separat și de scopul analizei.

Faza mobila: Faza mobilă este o combinație de solvenți utilizați în HPLC pentru a trece o probă printr-o coloană de separare. Faza mobilă constă de obicei dintr-un amestec de solvenți, care poate fi un singur solvent sau un amestec de mai mulți solvenți într-o anumită proporție. Alegerea fluxului adecvat este foarte importantă pentru efectul de separare.

Pompa: Pompa este folosită pentru a asigura faza mobilă și a o împinge prin coloana de separare la o anumită presiune. Pompele obișnuite includ pompa de presiune constantă și pompa de gradient. Pompa de gradient poate realiza modificarea liniară sau neliniară a compoziției fazei mobile, astfel încât să se obțină un efect de separare mai bun.

Injector: Injectorul este utilizat pentru a introduce proba de analizat în sistemul HPLC. Prelevatorul poate fi o seringă acţionată manual sau un prelevator automat. Ele au, de obicei, caracteristicile unui volum precis și o repetabilitate bună pentru a asigura o injecție precisă a probei.

Cuptor coloană: Cuptorul cu coloană este utilizat pentru a controla temperatura coloanei de separare. Prin controlul temperaturii, coeficientul de distribuție și viteza de separare a probei în coloană pot fi modificate, optimizând astfel efectul de separare.

Detector: Detectorul este utilizat pentru a detecta compusul separat și pentru a genera un semnal electric legat de concentrația acestuia. Detectoarele obișnuite includ detectorul de absorbție ultraviolet-vizibil, detectorul de fluorescență și detectorul electrochimic. Alegerea detectorului depinde de caracteristicile compusului care trebuie analizat și de cerințele de sensibilitate de detecție.

Sistem de achizitie de date: Sistemul de achiziție de date este utilizat pentru a primi, înregistra și analiza semnalele emise de detector. Poate converti semnalul detectat în parametri precum zona de vârf și timpul de retenție și poate oferi analiză și interpretare a rezultatelor.

 

După ce solventul este îndepărtat deevaporator rotativ, proba obținută este de obicei concentrată sau solidă. Dacă doriți să analizați sau să detectați în continuare compușii din probă, îi puteți analiza prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC).

Etape generale pentru analiza probelor după evaporarea rotativă prin HPLC

 

1. Dizolvarea probei: se dizolvă proba după evaporare rotativă într-un solvent adecvat. Solubilitatea substanței care trebuie analizată și cerințele condițiilor de analiză HPLC trebuie luate în considerare atunci când se selectează solvenți.

2. Prepararea soluției standard: Dacă este necesară o analiză cantitativă, soluția standard a compusului de testat poate fi pregătită pentru corectarea și calcularea ulterioară a rezultatelor analizei.

3. Efectuați analiza HPLC: injectați proba în sistemul HPLC și configurați coloana de separare, faza mobilă și detectorul corespunzătoare. În funcție de scopul analizei, selectați metode și parametri corespunzători, cum ar fi debitul, temperatura și programul de gradient.

4. Colectarea și analiza datelor: cromatograma probei este colectată prin sistemul HPLC, iar compusul țintă este cuantificat sau identificat în funcție de aria de vârf, timpul de retenție sau alți parametri înrudiți. Metoda curbei standard și metoda standard internă pot fi utilizate pentru analiza cantitativă.

5. Interpretarea rezultatelor: Conform rezultatelor analizei, compușii din probă au fost evaluați calitativ și cantitativ. În funcție de nevoi, puteți genera rapoarte sau înregistra rezultatele analizelor.

 

Aplicarea rotovap în analiza HPLC are două semnificații practice

 

• Concentrația probei: În unele cazuri, concentrația probei de analizat poate fi prea scăzută, astfel încât evaporatorul rotativ chimic poate fi utilizat pentru a concentra proba pentru a crește sensibilitatea de detecție a analitului în HPLC.
• Îndepărtarea solvenților: În unele probe, solvenții pot interfera cu analiza HPLC, de aceea este necesar să se îndepărteze sau să se înlocuiască solvenții din probe cu solvenți adecvați pentru HPLC. Evaporatorul rotativ de laborator poate ajuta la îndepărtarea solventului și la transformarea probei într-o formă adecvată pentru analiza HPLC.

 

analiza HPLC șievaporator rotativsunt două tehnici frecvent utilizate în analiza chimică și au unele diferențe și conexiuni în principiu și aplicare.

 

Diferență

 

Principiu: HPLC se bazează pe principiul cromatografiei lichide, iar separarea și analiza cantitativă se realizează prin interacțiunea dintre faza staționară (coloană) și faza mobilă (solvent). Evaporatorul folosește principiul încălzirii și rotației pentru a evapora rapid proba lichidă și a îndepărta solventul, astfel încât să concentreze proba sau să schimbe mediul solvent al probei.

Câmpul de aplicare: HPLC este utilizat pe scară largă în chimie, farmacie, mediu și alte domenii și poate fi utilizat pentru separarea, identificarea și analiza cantitativă a compușilor din amestecuri complexe; Evaporarea rotativă este utilizată în principal în procesul de concentrare a probei, îndepărtarea solvenților și prepararea probei și este utilizată în mod obișnuit în sinteza organică, extracția produselor naturale, pregătirea probelor și în alte domenii.

Viteza de analiză: Analiza HPLC durează de obicei mult timp pentru a separa și detecta probele, ceea ce poate dura de la câteva minute la câteva ore; Unitatea de evaporator rotativ cu vid poate evapora probele lichide rapid într-un timp scurt, de obicei durând doar câteva minute.

 

Conectați

 

Tratamentul probei: Echipamentul cu evaporator rotativ este adesea folosit pentru concentrarea probelor sau îndepărtarea solvenților în timpul pregătirii probelor pentru a face probe adecvate pentru metode de analiză ulterioare, cum ar fi HPLC. Efectul și acuratețea analizei HPLC pot fi îmbunătățite prin concentrarea probei și îndepărtarea solventului prin evaporator rotativ.

Selectarea solventului: În analiza HPLC, alegerea solventului este foarte importantă pentru efectul de separare; Theevaporator rotativpoate ajuta la îndepărtarea solventului din probă și la transformarea probei într-o formă adecvată pentru analiza HPLC. Prin urmare, evaporatorul rotativ poate oferi condiții satisfăcătoare de solvenți pentru analiza HPLC.

 

Oferim rotovap cu ridicare manuală și rotovap cu ridicare electrică, vă rugăm să ne contactațisales@achievechem.compentru a vă personaliza propriul evaporator rotativ.